桫椤科植物DNA提取方法研究
作者:
应站明,应正河,潘伟华
来源:
暂无
日期:
暂无
文献类型:
期刊
关键词:
CTAB法
SDS法
ISSR
桫椤科
描述:
[目的]探讨桫椤科植物DNA提取的最优方法。[方法]采用经过改良的SDS法和CTAB法对3种桫椤科植物进行基因组DNA提取,用紫外分光光度计测定其在波长260和280nm处的吸光值,并根据A(下标 260nm)/A(下标 280nm)的比值分析其DNA的纯度。将提取的基因组DNA进行叶绿体trnL-trnF非编码区序列扩增和ISSR分析。[结果]改进的CTAB法所提出的DNA较纯净,所获得DNA样品的A(下标 260nm)/A(下标 280nm)比值在1.750~2.050范围内,琼脂糖凝胶电泳图谱显示条带清晰。[结论]改良的CTAB法更适合桫椤科植物DNA的提取。
篦子三尖杉ISSR-PCR体系优化
作者:
应站明,杨明照,苏应娟
来源:
暂无
日期:
暂无
文献类型:
期刊
关键词:
篦子三尖杉
ISSR
正交设计
PCR
描述:
采用正交设计法研究适合篦子三尖杉(Cephalotaxus oliveri)的ISSR-PCR反应体系,对影响ISSR-PCR的模板、引物、Mg2+、dNTP、Taq酶等5个因素进行了优化。确定了篦子三尖杉ISSR-PCR扩增的最佳体系,即20μl的反应体系中包括:1μl 10×PCRbuffer、2.5 mmol/LMg2+、0.2 mmol/L dNTPs、0.25mol/L的ISSR引物、1.5UTaqDNA聚合酶、50 ng模板DNA。运用优化的体系对江西武功山篦子三尖杉总DNA进行ISSR-PCR扩增,获得较好效果。
中华桫椤DNA提取及ISSR分析
作者:
应站明,黎桂芳,王海舟
来源:
暂无
日期:
暂无
文献类型:
期刊
关键词:
SDS法
中华桫椤
改良CTAB法
ISSR
描述:
[目的]研究中华桫椤总DNA的提取方法。[方法]采用SDS法和改良CTAB法提取中华桫椤总DNA,通过电泳检测方法进行比较。[结果]用改良CTAB法得到的DNA浓度和纯度都较高,基本上无蛋白质、多糖等杂质。用改良CTAB法得到的总DNA进行ISSR-PCR扩增,谱带清晰,获得较好的效果。[结论]为提取高质量的DNA样品奠定了基础,并为探讨中华桫椤自然居群的遗传多样性和种群遗传结构及进一步保护和利用中华桫椤提供了分子遗传学依据。